Thử nghiệm cấy truyền phôi bò ứng dụng kỹ thuật cố định thời gian cấy phôi | CHĂN NUÔI VIỆT NAM
ĐẶT VẤN ĐỀ
Cấy truyền phôi là một kỹ thuật tương hỗ sinh sản trải qua đó làm tăng số bê con được sinh ra từ những bò cái có giá trị cao ( Gabriel và cs., 2012 ). Trong đó bò cái nhận phôi đóng vai trò rất quan trọng đến thành công xuất sắc của kỹ thuật cấy truyền phôi. Để cấy truyền phôi cho bò cái nhận phôi một cách dữ thế chủ động người ta cần gây động dục đồng pha cho bò cái nhận phôi. Có thể sử dụng nhiều công thức gây động dục đồng pha cho bò cái nhận phôi, đơn thuần và tiết kiệm ngân sách và chi phí nhất là người ta sử dụng Prostaglandin ( PG ), tuy nhiên hiệu suất cao của giải pháp này không cao ( Bó và cs., 2002 ). Công thức gây động dục đồng pha với sự tích hợp của Gonadotropin Releasing Hormone ( GnRH ) và Prostaglandin ( PG ) phối hợp với những loại vòng tẩm progesterone / progestogen ( P4 ) đã được triển khai thành công xuất sắc trong việc tinh chỉnh và điều khiển hoạt động giải trí của nang trứng và thể vàng và gây rụng trứng ở bò cái nhận phôi mà không cần theo dõi và phát hiện động dục, quy trình tiến độ này được gọi là cố định và thắt chặt thời hạn cấy truyền phôi ( tiếng Anh là fixed-time embryo transfer ( FTET ) ( Baruselli và cs., 2000, 2001 ; Bó và cs., 2001, 2002 ) .
Mục tiêu của nghiên cứu này là thử nghiệm công thức cố định thời gian cấy truyền phôi bằng kết hợp Gonadotropin (GnRH), Prostaglandin (PG) và vòng tẩm progesterone đặt âm đạo bò cái nhận phôi để cấy truyền phôi bò in vivo cho bò cái nhận phôi mà không cần phát hiện động dục và đánh giá hiệu quả của phương pháp mới này.
Bạn đang đọc: Thử nghiệm cấy truyền phôi bò ứng dụng kỹ thuật cố định thời gian cấy phôi | CHĂN NUÔI VIỆT NAM
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Vật liệu nghiên cứu
Trong nghiên cứu và điều tra này chúng tôi chọn ra 20 bò cái nhận phôi đủ tiêu chuẩn về sức khỏe thể chất, thể trạng và năng lực sinh sản theo những tiêu chuẩn của bò cái nhận phôi trong đó 15 bò sữa giống lai HF và 5 bò thịt giống lai Brahman .
Bò nhận phôi được nuôi theo phương pháp nuôi nhốt trong chuồng, thức ăn gồm có thức ăn thô xanh là những loại cỏ, thức ăn ủ chua và thức ăn tinh hỗn hợp chế biến sẵn và được cho uống nước sạch tự do. Bò nhận phôi là bò sữa trong tiến trình cho sữa thì được vắt 2 lần / ngày vào buổi sáng và chiều tối .
Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Thời gian nghiên cứu và điều tra : Từ 08/2018 – 09/2019
Địa điểm điều tra và nghiên cứu : Học viện Nông nghiệp Nước Ta và Trung tâm nghiên cứu và điều tra Bò và Đồng cỏ Ba Vì, TP. Hà Nội
Phương pháp nghiên cứu
Gây động dục đồng pha ở bò cái nhận phôi
Trong nghiên cứu và điều tra này chúng tôi sử dụng tiến trình Ovsynch + CIDR để gây rụng trứng đồng pha và cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi ở bò cái nhận phôi. Công thức Ovsynch + CIDR như bên dưới :
Hình 1. Quy trình gây động dục đồng pha và cấy truyền phôi cố định thời gian (FTET) Đặt vòng tẩm progesterone đặt âm đạo bò trong 7 ngày ( Vòng CIDR tẩm 1,38 g progesterone do New Zealand sản xuất ), 7 h sáng của ngày tiên phong đặt vòng đồng thời tiêm 200 µg Gonadorelin ( Ovurelin, Bayer của Đức sản xuất ) với mục tiêu gây rụng trứng nang trứng trội hiện có trên buồng trứng để tạo thể vàng mới, đồng thời làm cho một đợt sóng nang mới Open trên buồng trứng của bò cái nhận phôi, đến 7 h chiều của ngày thứ 7 chúng tôi cho triển khai rút vòng CIDR ( Zoetis, New Zealand sản xuất ) từ âm đạo của bò cái nhận phôi ra đồng thời tiêm bắp 500 µg Cloprostenol ( Ovuprost, công ty Bayer sản xuất ) đây là một dạng khác của Prostaglandin F2α nhằm mục đích gây thoái hóa và tiêu biến thể vàng, làm cho hàm lượng progesterone trong máu bò cái nhận phôi bất thần giảm xuống và mất đi trong máu kích thích bò cái nhận phôi động dục, thường thì bò cái sẽ động dục sau khi rút vòng progesterone 48-56 giờ, tới ngày thứ 9 của quá trình triển khai tiêm 200 µg Gonadorelin ( Ovurelin, Bayer Đức sản xuất ) để kích thích bò cái nhận phôi rụng trứng và ngày thứ 16 của tiến trình thì triển khai cấy truyền phôi .
Cấy truyền phôi
Cấy truyền phôi được thực thi bằng giải pháp không phẫu thuật bằng súng cấy phôi thế hệ mới-súng cấy phôi sâu. Phôi bò được chứa trong cọng rạ. Trường hợp sử dụng phôi ướp đông thì trước khi cấy phôi thì phải thực thi giải đông phôi bằng nước ấm 30 οC / 10 s. Sau đó nạp phôi vào súng cấy phôi và triển khai cấy phôi, phôi được đưa vào sừng tử cung bên buồng trứng hoàn toàn có thể vàng .
Chẩn đoán có thai ở bò cái nhận phôi sau khi cấy truyền phôi
Trong điều tra và nghiên cứu này chúng tôi thực thi chẩn đoán bò cái nhận phôi có thai trải qua ba giải pháp sau :
Phương pháp theo dõi bò cái nhận phôi không động dục trở lại
Nếu sau khi cấy phôi khoảng trung bình là 14 ngày mà thấy bò cái xuất hiện động dục trở lại thì có nghĩa bò cái nhận phôi không có chửa, nếu bò cái không xuất hiện động dục trở lại thì có thể bò cái nhận phôi đã có chửa. Tuy nhiên, cần khám lại bằng phương pháp khám tay thông qua trực tràng sau đó 30-45 ngày, hoặc siêu âm ở 30-35 ngày để khẳng định chắc chắn.
Xem thêm: Chung tình yêu nông thôn
Chẩn đoán thai bằng chiêu thức dùng máy siêu âm
Chúng tôi hầu hết sử dụng giải pháp siêu âm để chẩn đoán bò cái nhận phôi có thai ở ngày thứ 30 sau khi cấy phôi và siêu âm lại ở ngày thứ 45 .
Xử lý số liệu
Tất cả số liệu được ghi chép, tàng trữ và giải quyết và xử lý bằng ứng dụng Microsoft Excel 2013 .
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
Tiến hành gây động dục đồng pha cho 20 bò cái nhận phôi đủ tiêu chuẩn được tinh lọc trong đó có 15 bò sữa và 5 bò thịt bằng tổng hợp hormone sinh sản, bằng công nghệ tiên tiến tiên tiến và phát triển trải qua sử dụng những tổng hợp hormone sinh sản đã cho phép cố định và thắt chặt được thời hạn cấy truyền phôi. Thông qua việc sử dụng những tổng hợp hormone người ta đã tinh chỉnh và điều khiển và đồng điệu được hoạt động giải trí của buồng trứng, quy trình rụng trứng và hình thành thể vàng, vì thế khi sử dụng tổng hợp hormone này thì không cần phải theo dõi, phát hiện bò cái nhận phôi động dục mà cứ thời hạn đã xác lập trong quy trình tiến độ là triển khai cấy truyền phôi. Trong điều tra và nghiên cứu này chúng tôi sử dụng quy trình tiến độ Ovsynch + CIDR để gây rụng trứng đồng pha và cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi ở bò cái nhận phôi .
Tất cả bò cái nhận phôi sau khi được giải quyết và xử lý hormone theo tiến trình Ovsynch + CIDR sẽ được cấy phôi vào ngày thứ 16 của tiến trình bằng giải pháp không phẫu thuật với phôi tươi và phôi ướp lạnh được tạo ra bằng giải pháp in vivo, phôi bào được cấy vào sừng tử cung của bò cái bên phía buồng trứng hoàn toàn có thể vàng. Trong tiểu dự án Bất Động Sản này chúng tôi triển khai cấy truyền phôi cho tổng số 20 bò cái nhận phôi trong đó có 5 con bò thịt và 15 con bò sữa nhận phôi. Kết quả cấy truyền phôi bò được bộc lộ ở Bảng 1 dưới đây :
Sau khi cấy truyền phôi 14 ngày thực thi theo dõi bò cái nhận phôi động dục, những bò cái nhận phôi Open động dục trở lại sau khi cấy phôi trung bình 14 ngày được xác lập là không có chửa, những bò còn lại không Open động dục trở lại thì thực thi chẩn đoán có thai bằng siêu âm sau khi cấy truyền phôi từ 30-35 ngày và sau đó 2 tuần liên tục siêu âm lại. Kết quả về nhìn nhận mang thai ở bò cái nhận phôi được biểu lộ ở Bảng 1 .
Qua Bảng 2 cho thấy tỷ suất có chửa trung bình của bò cái nhận phôi sau khi cấy truyền là 50 % trong đó nhóm bò thịt có tỷ suất chửa trung bình cao hơn với 60 % ( 3/5 bò có chửa ) so với nhóm bò sữa với 46,7 % ( 7/15 bò có chửa ), tuy nhiên sự sai khác này không có ý nghĩa về mặt thống kê ( P > 0,05 ). Để nhìn nhận tỷ suất có chửa của bò cái nhận phôi theo dạng phôi : phôi tươi hoặc phôi ướp đông chúng tôi chia nhóm tác dụng tỷ suất có chửa theo dạng phôi. Kết quả được trình diễn ở Bảng 3 .
Qua Bảng 3 tất cả chúng ta thấy tỷ suất có chửa của bò cái nhận phôi khi cấy bằng phôi tươi cao hơn khi cấy bằng phôi ướp lạnh trong cả hai nhóm bò thịt và bò sữa với tỷ suất chửa tương ứng là 62,5 % và 41,7 % và tỷ suất này có sự chênh lệch có ý nghĩa về thống kê ( P < 0,05 ), đơn cử nhóm bò sữa được cấy phôi tươi có tỷ suất có chửa là 60,0 % so với 40,0 % với phôi ướp đông, với nhóm bò thịt thì cấy phôi tươi cho tỷ suất có chửa cao với 66,7 % so với 50,0 % khi cấy phôi ướp lạnh. Điều này cho thấy nên cấy phôi bò bằng phôi tươi sẽ cho tỷ suất có chửa cao hơn phôi ướp đông. Tuy nhiên, để cấy được phôi tươi thì công tác làm việc gây động dục đồng pha ở bò cái nhận phôi phải thật sự tốt để đồng điệu hoạt động giải trí của buồng trứng và tử cung cũng như động dục của bò cái cho phôi phải trùng với bò cái nhận phôi .
Theo tác dụng nghiên cứu và điều tra của Hisashi và cs. ( 2017 ) tại Nhật Bản khi theo dõi trên 621 lần cấy phôi cho bò sữa Holstein và 527 lần cấy phôi cho bò đen Nhật Bản bằng phôi ướp lạnh cho hiệu quả tỷ suất có chửa xê dịch theo những tháng trong năm với trung bình ở bò sữa là 45,4 % cao nhất khi cấy phôi vào tháng 4 ( 60,9 % ) và bò thịt giống Bò đen của Nhật Bản là 42,2 % ( cao nhất vào tháng 5 với 51,8 % có chửa ). Tỷ lệ có chửa ở bò nhận phôi trong điều tra và nghiên cứu của chúng tôi so với bò sữa Holstein thì thấp hơn 5,4 % so với ở Nhật Bản tuy nhiên với bò thịt thì tác dụng của chúng tôi cao hơn so với tỷ suất có chửa trung bình khi cấy phôi bò đen Nhật Bản. Điều này hoàn toàn có thể là do điều kiện kèm theo về giống bò, thể trạng, dinh dưỡng, khí hậu ở hai nước có sự khác nhau. Đồng thời số lượng bò cái nhận phôi được cấy truyền trong điều tra và nghiên cứu của tiểu dự án Bất Động Sản của chúng tôi ít hơn so với nghiên cứu và điều tra tại Nhật Bản ( 20 bò so với 1.149 bò ) .
Kết quả điều tra và nghiên cứu của chúng tôi cũng khá tương đương với tác dụng điều tra và nghiên cứu của tác giả Baruselli và cs. ( 2011 ) khi điều tra và nghiên cứu về cấy truyền phôi ướp đông cho 5.041 bò sữa Holstein cao sản tại Achentina thì cho hiệu quả tỷ suất có chửa vào mùa mát ( mùa thu và mùa đông ) là 40,7 % và vào mùa nóng ( mùa xuân và mùa hạ ) là 37,7 %. Tác giả Siqueira và cs. ( 2009 ) khi nghiên cứu và điều tra cấy truyền phôi bò cho bò nhận phôi là bò lai tại Brazil và dùng công thức cố định và thắt chặt thời hạn cấy truyền phôi sử dụng 2 mg oestradiol benzoate tiêm cho bò cái nhận phôi và đặt vòng tẩm progesterone CIDR ( chứa 1,9 g progesterone ) vào ngày 0 của tiến trình, ngày 5 tiêm 400 IU huyết thanh ngựa chửa, tới ngày 8 của tiến trình thì tiêm Prostaglandin F2α ( PGF2α ) đồng thời rút vòng, ngày thứ 9 tiêm 1 mg estradiol benzoate ( EB ) và tới ngày thứ 17 thì cấy truyền phôi. Kết quả thu được tỷ suất có chửa của bò cái nhận phôi với phôi in vivo là 58,8 % và 31,0 % với phôi in vitro. Tương tự như điều tra và nghiên cứu của tác giả Siqueira và cs. ( 2009 ) thì điều tra và nghiên cứu của Lagioia, canadian needs a prescription in us J. và cs. ( năm nay ) khi so sánh hiệu quả cấy truyền phôi bằng phôi tươi và phôi ướp lạnh với hai giải pháp là phát hiện động dục và cố định và thắt chặt thời hạn cấy truyền phôi cũng cho hiệu quả với giải pháp cố định và thắt chặt thời hạn cấy truyền phôi mà không cần phát hiện động dục cho tỷ suất có chửa ở bò cái nhận phôi với phôi tươi là 59,6 % và phôi ướp lạnh là 49,0 %. Tỷ lệ có chửa khi cấy phôi tươi giữa hai giải pháp là tương tự không có sự độc lạ ( 59,6 % với cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi và 60,5 % với giải pháp phát hiện động dục ) tuy nhiên khi cấy phôi ướp đông thì tỷ suất có chửa có phần chênh lệch ( 49,0 % với chiêu thức cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi và 59,1 % với giải pháp phát hiện động dục ). Qua đây cho thấy với cấy phôi tươi thì sử dụng cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi vẫn mang lại hiệu suất cao cao, tuy nhiên với phôi ướp đông thì giải pháp phát hiện động dục ở bò cái nhận phôi cho tác dụng cao hơn là cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi, điều này hoàn toàn có thể lý giải là giải pháp phát hiện động dục sau đó cấy phôi sau 7 ngày cho hiệu quả đồng pha đúng mực hơn là cố định và thắt chặt thời hạn cấy phôi, vì phôi ướp lạnh sức sống sẽ thấp hơn với phôi tươi thế cho nên thời gian cấy phôi đúng mực rất tác động ảnh hưởng rất lớn tới tỷ suất có chửa của bò cái nhận phôi sau cấy truyền .
KẾT LUẬN
Kết quả cấy truyền phôi bò in vivo cố định và thắt chặt thời hạn cấy truyền phôi cho thấy :
Tỷ lệ có chửa trung bình ở bò cái nhận phôi là 50 % ( 10/20 ) trong đó tỷ suất có chửa ở bò thịt là 60 % ( 3/5 ) cao hơn tỷ suất có chửa ở bò sữa là 46,7 % ( 7/15 ) .
Tỷ lệ có chửa của bò cái nhận phôi khi được cấy bằng phôi tươi với 62,5% (5/8) cao hơn cấy bằng phôi đông lạnh với 41,7% (5/12).
Nguyễn Công Toản và cs
Tạp chí KHCN Chăn nuôi số 105
Viện Chăn nuôi
Source: https://laodongdongnai.vn
Category: Nông Thôn
