Phương pháp Elisa là gì | A – Z Kiến thức về hệ thống kiểm tra sinh học Elisa
4.9
/
5
(
10
bầu chọn
)
Kỹ thuật Elisa (Enzyme-linked immunosorbent assay) là một phương pháp sinh hoá được sử dụng chủ yếu trong miễn dịch học để phát hiện sự hiện diện của một kháng thể hoặc kháng nguyên trong một mẫu; Elisa được sử dụng như một công cụ chẩn đoán y học và bệnh lý học thực vật, cũng như kiểm soát chất lượng trong các ngành công nghiệp khác nhau.
Hiểu được các giá trị quan trọng của xét nghiệm Elisa mang lại cho chẩn đoán tác nhân gây bệnh trong y học, Hãng Awareness – Mỹ đã cho ra thị trường các dòng máy xét nghiệm Elisa hiện đại, giúp thực hiện phản ứng nhanh hơn, an toàn hơn, cho kết quả chính xác cao. Hiện nay các dòng máy xét nghiệm phương pháp Elisa của Hãng Awareness có mặt rất nhiều nơi trên thế giới trong đó có Việt Nam. Sau đây chúng ta cùng tìm hiểu rõ ràng hơn về tầm quan trọng của phương pháp Elisa.
Nội Dung Chính
1. Phương pháp Elisa là gì ?
Để triển khai một phản ứng ELISA gồm có tối thiểu một kháng thể bắt cặp đặc hiệu với kháng nguyên đơn cử. Các mẫu có số lượng kháng nguyên chưa biết được cố định và thắt chặt trên một mặt phẳng vững chãi – giá thể rắn ( thường là một tấm polystyrene vi chuẩn ) hoặc không đặc hiệu ( trải qua hấp phụ lên mặt phẳng ) hoặc đặc hiệu ( trải qua chụp bằng kháng thể khác đặc hiệu với kháng nguyên tương tự như trong thí nghiệm ELISA sandwich ) .
Sau khi kháng nguyên được cố định và thắt chặt, những kháng thể phát hiện được thêm vào, tạo thành một phức tạp với những kháng nguyên. Các kháng thể phát hiện hoàn toàn có thể link với một loại enzyme, hay chính nó hoàn toàn có thể được phát hiện bởi một kháng thể thứ cấp link với một loại enzyme trải qua link cộng hóa trị giữa những phân tử sinh học. Các phần của kháng thể ELISA là tựa như với giải pháp western blot. Giữa mỗi bước, những đĩa thường được rửa bằng dung dịch tẩy nhẹ để vô hiệu những protein hoặc những kháng thể không gắn. Sau bước rửa sau cuối, cơ chất của enzyme được thêm vào để tạo ra tín hiệu hoàn toàn có thể nhìn thấy, giúp chỉ ra số lượng kháng nguyên trong mẫu .
>> > Tìm hiểu thêm thông tin chi tiết cụ thể về Elisa : Tại đây
2. Các phương pháp Elisa phổ biến
Có ba chiêu thức :
A. Phương pháp ELISA trực tiếp:
Sử dụng một kháng thể có gắn cơ chất enzyme sẽ link trực tiếp với kháng nguyên trên mặt phẳng đĩa phản ứng .
Ưu điểm:
Nhanh, vì chỉ sử dụng một kháng thể có gắn cơ chất à hạn chế tối đa các thao tác khi thực hiện phản ứng.
Loại bỏ được phản ứng chéo của kháng thể thứ cấp.
Nhược điểm:
Hoạt động miễn dịch của kháng thể sơ cấp có thể bị ảnh hưởng xấu bởi enzyme hoặc cơ chất gắn,
Khó khăn và tốn kém trong việc lựa chọn kháng thể cho phản ứng.
Không linh hoạt trong việc lựa chọn các cơ chất gắn.
Tín hiệu khuếch đại thu được thấp.
B. Phương pháp ELISA gián tiếp:
Trong chiêu thức này, một kháng thể thứ cấp sẽ được bổ trợ và bắt cặp đặc hiệu với kháng thể sơ cấp đã bắt cặp với kháng nguyên. Kháng thể thứ cấp có gắn cơ chất sẽ phát tín hiệu khuếch đại khi xảy ra phản ứng bắt cặp kháng nguyên kháng thể đặc hiệu .
Ưu điểm:
Linh hoạt trong việc sử dụng các kháng thể thứ cấp có gắn cơ chất.
Linh hoạt và dễ dàng trong việc lựa chọn kháng thể sơ cấp cho phản ứng.
Hoạt động miễn dịch của kháng thể sơ cấp có thể phát huy tối đa vì không bị ảnh hưởng bởi cơ chất đánh dấu.
Độ nhạy cao.
Linh hoạt trong việc sử dụng cơ chất.
Nhược điểm:
Có thể xảy ra phản ứng chéo với các kháng thể thứ cấp à độ đặc hiệu của phản ứng bị ảnh hưởng.
Thời gian thực hiện phản ứng lâu hơn.
C. Phương pháp ELISA “Sandwwich”:
Một kháng thể gắn sẽ được sử dụng để gắn với kháng thể sơ cấp, tiếp theo kháng thể thứ cấp có gắn cơ chất enzyme được bổ trợ để bắt cặp với kháng thể thứ cấp trong phản ứng. Tín hiệu khuếch đại thu được khi có sự bắt cặp kháng nguyên – kháng thể đặc hiệu .
Ưu điểm:
Mẫu không cần tinh sạch trước khi phân tích.
Độ đặc hiệu cao
Thích hợp cho các mẫu phức tạp.
Linh hoạt và độ nhạy cao.
Các giải pháp Elisa thông dụng
Xem thêm : MÁY RỬA KHAY VI THỂ STAT FAX 2600 sử dụng trong giải pháp Elisa
3. Các ứng dụng của xét nghiệm ELISA trong Y học
3.1 Từ sàng lọc ung thư đến thử nghiệm thuốc và mang thai
Xác định dấu ấn ung thư sớm là một trong những thử thách liên tục được những nhà khoa học tăng trưởng và điều tra và nghiên cứu do việc phát hiện sớm ung thư có năng lực chữa khỏi, lê dài thời hạn sống và nâng cao chất lượng sống cho người bệnh ung thư. Các kỹ thuật dựa trên ELISA đều có sẵn để sử dụng và được ứng dụng thoáng đãng trong thực hành thực tế lâm sàng để xét nghiệm cho người bệnh ung thư quy trình tiến độ đầu gồm có ung thư buồng trứng và ung thư vú .
Ngoài ra, ELISA được ứng dụng để phát hiện nồng độ những chất phạm pháp như cannabinoids, amphetamine, thuốc phiện, cocaine, benzodiazepin và methadone, hoàn toàn có thể được xác lập bằng chiêu thức ELISA trong mẫu nước tiểu. Phương pháp này cũng hoàn toàn có thể được sử dụng để theo dõi mức độ nồng độ dược chất ở bệnh nhân đang điều trị, ví dụ, kháng thể chống nhiễm trùng trong viêm khớp dạng thấp và bệnh nhân viêm ruột .
ELISA cũng thường được sử dụng để kiểm tra phát hiện hormone gonadotrophin màng đệm ở người ( hCG ) trong nước tiểu để phát hiện phụ nữ đang mang thai hoặc một số ít bệnh khác .
Xét nghiệm vi rút nhờ giải pháp Elisa
Xét nghiệm ELISA hoàn toàn có thể được sử dụng để chẩn đoán những bệnh đơn cử như sau :
- HIV
- Bệnh Lyme
- Bệnh thiếu máu ác tính (pernicious anemia)
- Sốt đốm Rocky Mountain (Rocky Mountain spotted fever)
- Tiêu chảy do rotavirus
- Ung thư biểu mô tế bào vảy (squamous cell carcinoma)
- Bệnh giang mai
- Bệnh toxoplasmosisvirus varicella-zoster, gây bệnh thủy đậu và bệnh zona
- Virus Zika
ELISA thường được sử dụng như một công cụ sàng lọc trước khi những xét nghiệm nâng cao hơn được nhu yếu. Bác sĩ hoàn toàn có thể chỉ định xét nghiệm này nếu bạn có tín hiệu hoặc triệu chứng của những bệnh kể trên hoặc dùng để loại trừ bệnh mà bác sĩ đang hoài nghi .
4. Phát hiện kháng thể tiểu cầu
Phát hiện kháng thể tiểu cầu trong huyết thanh được sử dụng để xác lập bệnh nhân mắc những rối loạn như Xuất huyết giảm tiểu cầu tự phát ( idiopathic thrombocytopenic purpura ) và bệnh lupus ban đỏ mạng lưới hệ thống ( systemic lupus erythematosus ). Ngoài việc cung ứng một chiêu thức ít tốn kém và phức tạp để phát hiện những kháng thể tiểu cầu, ELISA cũng thực thi để phân phối nhiều thông tin hơn những xét nghiệm khác như xét nghiệm lymphocytotoxicity ( LCT ) và xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang tiểu cầu ( PIIFT ) .
Phát hiện kháng thể tiểu cầu
5. Ứng dụng phương pháp Elisa trong đời sống
Hiện nay, Phương pháp ELISA được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu như y học, nông nghiệp và đặc biệt trong các quy trình kiểm tra chất lượng các sản phẩm sinh học.
Trong thực phẩm
- Kỹ thuật ELISA có thể phát hiện và định lượng vi sinh trong thực phẩm trong thời gian vài giờ sau khi tăng sinh.
- Phát hiện độc tố trong tảo
- Phát hiện vi khuẩn E.coli, Salmonell, Staphylococcus aureus, sán lá gan,.. trong thực phẩm.
- Phát hiện chất chloramphenicol trong tôm, cá và cá sản phẩm thuỷ sản
- Kiểm tra dư lượng kháng sinh trong thực phẩm, tàn dư thuốc diệt cỏ, thuốc trừ sâu,…
Trong y học
- Là một trong các kĩ thuật xét nghiệm HIV nhằm phát hiện kháng nguyên p24.
- Chẩn đoán và điều trị bệnh viêm gan siêu vi B và C, bệnh ung thư.
- Ứng dụng để phát hiện bệnh A.cantonensis (bệnh viêm màng não)
- Xác định tỷ lệ nhiễm kí sinh trùng sốt rét ở miền Trung – Tây Nguyên.
Trong nông nghiệp
- Chẩn đoán bệnh Tristeza (tác nhân gây bệnh héo rũ) trên cây cam quýt.
- Giám định sự hiện diện của BBTV gây bệnh chùn đọt ở chuối.
- Phát hiện kháng thể chống Mycoplasma hyopnewmonia (ML) ở heo.
- Giám định bệnh lùn xoắn lá ở lúa bằng phương pháp DAS ELISA cải tiến.
Xem thêm: Cách sử dụng máy rửa khay ELISA Awareness Stat Fax 2600
Source: https://laodongdongnai.vn
Category: Chia Sẻ Kiến Thức
